活動(dòng)尼龍袋法測(cè)定豬養(yǎng)分消化率的研究進(jìn)展

　摘要：對(duì)飼料原料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的準(zhǔn)確評(píng)定是研究動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要和制定日糧配方的前提和基礎(chǔ)。經(jīng)過(guò)反復(fù)改進(jìn)的活動(dòng)尼龍袋法具有測(cè)定速度快、測(cè)定成本低、所需待測(cè)樣品量小等優(yōu)點(diǎn)，是一種測(cè)定豬飼料原料養(yǎng)分消化率的新方法。此方法最初被應(yīng)用與反芻動(dòng)物，后被引入單胃動(dòng)物，經(jīng)反復(fù)修改，已取得良好的效果。本文通過(guò)綜述表明，活動(dòng)尼龍袋法可以應(yīng)用于豬飼料中各原料干物質(zhì)、能量和粗蛋白的表觀消化率。

　　引言

　　對(duì)豬飼料原料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的準(zhǔn)確評(píng)定是豬營(yíng)養(yǎng)需要量工程中非常重要的部分，目前被廣泛應(yīng)用的主要包括全收糞法和指示劑法(戴?等，2008; 蒙景茂等，2008;Thacker和Qiao，2001;Sauer等，1989)，但是耗時(shí)長(zhǎng)、成本高，而且工作量過(guò)大是這些傳統(tǒng)方法共有的缺點(diǎn)(Yin等，2002;Sauer等，1989)。早在1978年，Petty和Handlos就曾嘗試使用尼龍袋測(cè)定豬飼料原料的消化率，1983年Sauer等在他們的基礎(chǔ)上，結(jié)合反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)方法，建立了活動(dòng)尼龍袋法(Mobile nylon bag technical，MNBT)，它具有測(cè)定速度快、測(cè)定成本低、所需待測(cè)樣品量小等優(yōu)點(diǎn)，而且經(jīng)過(guò)十多年的改進(jìn)，該技術(shù)不斷地被完善，已經(jīng)具有推廣應(yīng)用的價(jià)值。

　　1 活動(dòng)尼龍袋法的基本程序

　　最早將尼龍袋技術(shù)應(yīng)用于測(cè)定豬飼料原料消化率數(shù)據(jù)是Petty和Handlos，1978年，他們直接將裝有飼料樣本的尼龍袋從口送入豬的體內(nèi)，直至排出，收集尼龍袋。結(jié)果發(fā)現(xiàn)由于尼龍袋在胃中停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，所以測(cè)定數(shù)據(jù)總是高于傳統(tǒng)法所得數(shù)據(jù)。

　　Sauer等(1983)在他們的基礎(chǔ)上，創(chuàng)建了活動(dòng)尼龍袋法，并且闡述了自己的操作程序：用網(wǎng)孔孔徑為48 µm的單纖絲尼龍制作成25×40 mm的小尼龍袋，將1 g粉碎粒度為0.8 mm的待測(cè)飼料樣品裝入尼龍袋，首先置于盛有500 mL的0.01 N鹽酸和胃蛋白酶溶液的燒杯中，將燒杯于37℃水浴中振蕩2.5 h，溶液pH為2.0，胃蛋白酶含量為377.4 IU/L。然后將尼龍袋從燒杯中取出，通過(guò)十二指腸瘺管引入體重為40 kg左右的健康豬體內(nèi)，待尼龍袋通過(guò)消化道后從糞中回收尼龍袋，用干紙巾輕輕揩去袋子表面糞便，冷凍干燥，測(cè)定袋內(nèi)剩余物質(zhì)中待測(cè)養(yǎng)分的含量，計(jì)算待測(cè)飼料養(yǎng)分消化率。

　　但是，與傳統(tǒng)法相比，用最初的活動(dòng)尼龍袋技術(shù)所測(cè)得的消化率數(shù)值變異較大(Sauer等，1983)。為了找出變異來(lái)源，Graham等(1985)和Cherian等(1988，1989)用生長(zhǎng)育肥豬做了進(jìn)一步的研究，表明體外消化的pH、胃蛋白酶濃度和時(shí)間以及待測(cè)飼料粉碎粒度、尼龍布網(wǎng)孔孔徑及尼龍袋大小對(duì)蛋白質(zhì)表觀消化率有顯著影響，其中以飼料粉碎粒度影響最大。Lin等(1995)在比較研究全收集食糜法與MNBT測(cè)定飼料粗蛋白質(zhì)(CP)、干物質(zhì)(DM)和氨基酸回腸表觀消化率時(shí)則觀察到體外模擬消化條件，包括溶液pH、胃蛋白酶的活性及模擬消化的時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果沒(méi)有影響。

　　關(guān)于MNBT測(cè)定豬飼料養(yǎng)分方法中存在許多爭(zhēng)議，如尼龍袋網(wǎng)孔孔徑太小、飼料樣品顆粒度和體外消化時(shí)間等。網(wǎng)孔孔徑的大小直接影響了消化液和袋內(nèi)物質(zhì)的交換，過(guò)大低估飼料蛋白質(zhì)和氨基酸的消化率(Sauer和de Lange.1989)，過(guò)低則會(huì)高估。Graham等(1985)研究表明當(dāng)網(wǎng)孔孔徑為20 m時(shí)，部分細(xì)菌可以出入尼龍袋。僅幾年又有學(xué)者表示，是否用水洗去尼龍袋上污染的糞便對(duì)MNBT方法的準(zhǔn)確性具有顯著的影響(Qiao和Thacker，2001)。根據(jù)Qiao和Thacker的最新的研究，經(jīng)過(guò)完善的MNBT的測(cè)定程序?yàn)椋菏紫葘? g粉碎粒度為1.0 mm的飼料原料放入網(wǎng)孔孔徑為48 µm、大小為25×40 mm2的尼龍袋中，四面封口;然后在pH為2.0、胃蛋白酶濃度為377.41 IU/L的溶液中，體外消化4 h，然后通過(guò)十二指腸普通T型瘺管引入;最后，通過(guò)集糞袋回收尼龍袋，不能用水沖洗，分別測(cè)定。譙仕彥等(2002)利用改進(jìn)的MNBT測(cè)定干物質(zhì)、能量和粗蛋白是消化率，與傳統(tǒng)法相比，相關(guān)性分布達(dá)到了93%、94%和76%，較未改進(jìn)的MNBT有明顯的提高。

　　2 活動(dòng)尼龍袋法測(cè)定飼養(yǎng)養(yǎng)分消化率

　　2.1 飼料干物質(zhì)消化率

　　主要思路為總結(jié)所有研究中的結(jié)果，找出相關(guān)性，然后引出改進(jìn)后尼龍袋法對(duì)測(cè)定準(zhǔn)確度的提高。

　　2.2 活動(dòng)尼龍袋法測(cè)定飼料能量消化率

　　(同前)主要思路為總結(jié)所有研究中的結(jié)果，找出相關(guān)性，然后引出改進(jìn)后尼龍袋法對(duì)測(cè)定準(zhǔn)確度的提高。

　　2.3 活動(dòng)尼龍袋法測(cè)定飼料粗蛋白消化率

　　(同前)主要思路為總結(jié)所有研究中的結(jié)果，找出相關(guān)性，然后引出改進(jìn)后尼龍袋法對(duì)測(cè)定準(zhǔn)確度的提高。

　　2.4 活動(dòng)尼龍袋法測(cè)定飼料中其他成分的消化率

　　主要思路為總結(jié)以前的實(shí)驗(yàn)，闡述回直腸吻合與MNBT結(jié)合的不可行性。